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Die Vor- und Nachteile des Lichtmikroskops beziehen sich auf Licht, Vergrößerung und Auflösung. Lichtmikroskope vergrößern das sichtbare Licht - ein offensichtlicher Vorteil, denn dies können unsere Augen sehen. Die Vergrößerung (wie groß ein Objekt erscheint) und die Auflösung (Detailgenauigkeit) sind jedoch bei Verwendung von Lichtmikroskopen begrenzt.
Lichtquelle
Lichtmikroskope verwenden entweder einen reflektierenden Spiegel oder ein elektrisches Licht zur direkten Beleuchtung durch die Probe und in das Linsensystem. Spiegelsysteme sind weniger teuer, erfordern jedoch eine angemessene Beleuchtung der Umgebung und mehr Geduld beim Einstellen. Elektrische Lichtsysteme sind teurer und erfordern eine Steckdose in der Nähe, sind jedoch einfacher zu verwenden.
Intensität des Lichts
Die Lichtintensität (Helligkeit) ist wichtig, wenn Licht durch die Probe fällt, die Sie sehen. Feine, durchscheinende (helle) Proben lassen sich am besten mit Licht geringer Intensität betrachten, während dickere, undurchsichtige Proben Licht mit höherer Intensität erfordern. Ein Nachteil der Lichtmikroskopie ist, dass einige Proben zu dick oder undurchsichtig sind, um mit einem solchen Mikroskop gesehen zu werden. Sehr dünne oder durchscheinende Proben können eingefärbt werden, um den Kontrast für eine bessere Anzeige zu erhöhen. Dieser Prozess wird jedoch lebende Exemplare töten.
Lichtintensität einstellen
Die Blende, die sich oberhalb der Lichtquelle und unterhalb der Auflageplatte (Probenplattform) befindet, passt die Lichtmenge an, die durch die Probe fällt. Es sind zwei Arten von Membranen erhältlich: ein Wahlschalter mit fester Blende und eine Kamera mit einstellbarer Blende.
Die Baugruppe mit fester Apertur besteht aus mehreren verschiedenen Aperturgrößen auf einer rotierenden Platte. Die gewünschte Blende wird durch Drehen des Einstellrads ausgewählt. Blenden mit fester Apertur sind weniger teuer, bieten jedoch eine weniger präzise Steuerung der Lichtintensität.
Die einstellbare Aperturblende ermöglicht eine stufenlos variable Blendengröße sowie die Blende eines Kameraobjektivs und ermöglicht so eine genauere Steuerung der Lichtintensität. Diese Systeme sind teurer.
Die Blende mit fester Blende ist unter der Bühne dieses Mikroskops sichtbar. (Mikroskop Bild von Tribalstar von Fotolia.com)
Vergrößerung
Größer ist nicht immer besser. Lichtmikroskope können Objekte bis zu 1000-fach (tausendfach größer als das Leben) sehr gut vergrößern. Darüber hinaus wird das Bild zunehmend verzerrt und verschwommen. Wenn Sie die Größe erhöhen, erhalten Sie kein besseres Bild, und das Bild ist tatsächlich unbrauchbar.
Mit einer Vergrößerung von bis zu 1000x können alle Arten lebender Organismen bis hin zu den kleinsten Bakterienzellen gesehen werden. Dies macht die Lichtmikroskopie zu einem leistungsfähigen Werkzeug für die Untersuchung von Zelltypen, Teichwasser, Bodenproben und anderen Studien, bei denen ein Überblick über Mikroorganismen erwünscht ist. Die Lichtmikroskopie ist jedoch wegen der mit der Verwendung von Licht verbundenen Auflösungsgrenzen für die Untersuchung subzellulärer Strukturen kaum nützlich.
Auflösung
Die Auflösung ist ein Maß für die Klarheit der in einem Bild erzeugten guten Details. Bilder mit niedriger Auflösung erscheinen verschwommen oder "verschwommen". Hochauflösende Bilder sind scharf, klar und detailliert. Der größte Nachteil von Lichtmikroskopen ist die Auflösungsgrenze. Zusätzlich zur 1000-fachen Vergrößerung verlieren Lichtmikroskope schnell die Möglichkeit, kleine Details fein abzustimmen. Dies ergibt sich aus den physikalischen Eigenschaften des Lichts und nicht aus der Qualität des Instruments. Zur besseren Auflösung von Details subzellulärer Strukturen sollten andere Technologien wie Elektronenmikroskope verwendet werden.